Naslov FRANCISELLA - MOLEKULARNI MEHANIZMI
PRILAGODBE NA STANICE AMEBA
Naslov (engleski) FRANCISELLA - MOLECULAR MECHANISMS OF
ADAPTATION TO AMOEBA CELLS
Autor Maša Knežević
Mentor Marina Šantić (mentor)
Član povjerenstva Darija Vukić Lušić (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstva Ana Budimir (član povjerenstva)
Član povjerenstva Darinka Vučković (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj Sveučilište u Rijeci Medicinski fakultet (Katedra za mikrobiologiju i parazitologiju) Rijeka
Datum i država obrane 2023-07-18, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO Kliničke medicinske znanosti Medicinska mikrobiologija
Univerzalna decimalna klasifikacija (UDC ) 61 - Medicina
Predmetni sustav (MESH - Medical Subject Headings )
Acanthamoeba
Francisella tularensis
VODA, MIKROBIOLOGIJA
Sažetak Cilj istraživanja: Francisella tularensis je gram-negativna, fakultativno unutarstanična bakterija koja se često može pronaći u vodenim ekosustavima. F. novicida, F. philomiragia i F. tularensis subsp. holarctica soj LVS mogu inficirati velik broj stanica, uključujući stanice Acanthamoeba castellanii u kojima je životni ciklus bakterije i održavanje u vodenom mikro okolišu nedovoljno razjašnjeno. Cilj navedenog istraživanja je doprinijeti razumijevanju molekularnih mehanizama adaptacije Francisella vrsta na A. castellanii i vodeni okoliš te istražiti otpornost i preživljavanje Francisella nakon stupanja u interakcije s amebama. Materijal i metode: Rezistencija Francisella vrsta nakon životnog ciklusa u A. castellanii i utjecaj kokultivacije na preživljavanje Francisella vrsta u izvorskim vodama ispitani su nasađivanjem bakterija na hranjive podloge te metodama transmisijske elektronske, fluorescentne i svjetlosne mikroskopije. Metodom protočne citometrije i kvantitativnim PCR-om u stvarnom vremenu ispitani su mehanizmi stanične smrti A. castellanii nakon infekcije. Naposlijetku, uloga genskih lokusa FPO i FNO evaluirana je pomoću ameba testa na hranjivoj podlozi. Rezultati: Rezultati ove studije pokazali su da A. castellanii- uzgojene Francisella vrste postaju podložnije djelovanju dezinficijensa, u usporedbi s in vitro uzgojenim bakterijama. Nadalje, Francisella sojevi pokazali su duže preživljavanje i preživljavanje u većem broju u kokulturi s amebama u usporedbi s preživljavanjem u vodama bez ameba. Francisella ne iducira apoptozu i nekrozu stanica A. castellanii, ali povećana ekspresija Atg16, Atg12 i Atg8 gena tijekom perioda infekcije ukazuje da proces autofagije ima važnu ulogu nakon infekcije ameba. Genski lokusi FPO i FNO nemaju ulogu tijekom interakcija F. novicida i A. castellanii što indicira da se F. novicida ne oslanja na T6SS tijekom interakcija s amebama. Zaključak: Neposredno nakon infekcije A. castellanii, Francisella vrste postaju podložnije djelovanju dezinficijensa u pokušaju odupiranja staničnoj smrti od strane ameba. Međutim, nakon dužeg vremenskog perioda kokultivacije, bakterije počinju iskorištavati hranjive tvari ameba i dugoročno bolje preživljavaju u prisustvu ameba. A. castellanii ima važnu ulogu u životnom ciklusu Francisella vrsta.
Sažetak (engleski) Objectives: Francisella tularensis is a Gram-negative, facultative intracellular bacterium commonly found in aquatic ecosystems. F. novicida, F. philomiragia, and F. tularensis subsp. holarctica strain LVS can infect a wide range of cells, including cells of Acanthamoeba castellanii. The life cycle of the bacterium and its maintenance in the aquatic microenvironment are poorly understood. The aim of the above research is to contribute to the understanding of the molecular mechanisms of Francisella species adaptation to A. castellanii and the aquatic environment, and to investigate Francisella resistance and survival after entering interactions with amoebae. Material and Methods: The post-entry life cycle resistance of Francisella species in A. castellanii and the effect of cocultivation on the survival of Francisella species in source water were investigated by inoculating bacteria onto culture media and using transmission electron, fluorescence, and light microscopy methods. The mechanisms of cell death of A. castellanii after infection were investigated by flow cytometry and quantitative real-time PCR. Finally, the role of FPO and FNO gene loci was evaluated using the amoeba plate test. Results: The results of this study showed that Francisella species cultured within A. castellanii were more susceptible to the effects of disinfectants compared to bacteria cultured in vitro. In addition, Francisella strains survived longer and in greater numbers in coculture with amoebae than in amoeba-free water. Francisella does not induce apoptosis and necrosis of A. castellanii cells, but the increased expression of Atg16, Atg12, and Atg8 genes during the infection period suggests that the autophagy process plays an important role after amoeba infection. The FPO and FNO gene loci do not play a role during interactions between F. novicida and A. castellanii, suggesting that F. novicida does not rely on the T6SS during interactions with amoebae. Conclusion: Immediately after infection of A. castellanii, Francisella species become more susceptible to the effects of disinfectants in an attempt to resist cell death by amoebae. However, after a prolonged period of cocultivation, bacteria begin to utilise amoebae nutrients and survive better in the presence of amoebae in the long term. A. castellanii plays an important role in the life cycle of Francisella species.
Ključne riječi
Acanthamoeba
Francisella
Mikrobiologija voda
Životni ciklus.
Ključne riječi (engleski)
Acanthamoeba
Francisella
Life Cycle
Water Microbiology
Jezik hrvatski
URN:NBN urn:nbn:hr:184:356709
Datum promocije 2023
Projekt Šifra: IP-2016-06-9003 Naziv: Uloga unutarstaničnog života Francisella tularensis u patogenezi eksperimentalne tularemije Naziv: The role of the intracellular life cycle of Francisella tularensis for the pathogenesis of experimental tularemia Kratica: FRANCYCLE Voditelj: Marina Šantić Pravna nadležnost: Hrvatska Financijer: HRZZ Linija financiranja: IP
Projekt Šifra: uniri-biomed-18-128 Naziv: Francisella molekularni mehanizmi prilagodbe na stanice amebama Naziv: Francisella-the molecular mechanisms of adaptation on amoeba cells Voditelj: Marina Šantić Pravna nadležnost: Hrvatska Financijer: NadSve Linija financiranja: Nema
Studijski program Naziv: Biomedicina Vrsta studija: sveučilišni Stupanj studija: poslijediplomski doktorski Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo (dr.sc)
Vrsta resursa Tekst
Način izrade datoteke Izvorno digitalna
Prava pristupa Pristup korisnicima matične ustanove
Uvjeti korištenja
Datum i vrijeme pohrane 2023-10-11 07:57:57