Access restricted to higher education institution's students and staff
master's thesis
Fenotipska obilježja BV-2 mikroglija stanica pod utjecajem hipoksije

Valentino Rački (2016)
Metadata
TitleFenotipska obilježja BV-2 mikroglija stanica pod utjecajem hipoksije
AuthorValentino Rački
Mentor(s)Natalia Kučić (thesis advisor)
Abstract
Novijim istraživanjima jasno je pokazan značaj interakcije imunološkog sustava i moždanog udara. Znamo da prirođeni imunološki sustav prvi reagira na ishemičnu ozljedu, odnosno predstavnici prirođenog imuniteta, mikroglija stanice. Iako postoje određena saznanja o funkciji mikroglija stanica iz in-vivo uvjeta, nejasan točan mehanizam složenih interakcija imunološkog sustava i stanica SŽ-a. Nadalje, nejasan je fenotip koji mikroglija poprima u hipoksiji te postoji debata o tome je li djelovanje mikroglije u tim uvjetima primarno citotoksično ili citoprotektivno. Cilj rada je uspostava in-vitro modela hipoksije i karakterizacija fenotipa mikroglija stanica pod uvjetima hipoksije. Za potrebe karakterizacije korištena je imortalizirana BV-2 linija mikroglije. Praćene su promjene u morfologiji stanica te su određene razine ekpresije aktivacijskih markera za M1 i M2 stanje, kako bi se utvrdilo postoji li predominacija pro ili protuupalnog stanja. Prvotna reakcija BV-2 mikroglija stanica na hipoksiju je akutna upala, što potvrđuju visoke razine IL-1β i HSP70. Kao odgovor na upalu postepeno se aktivira protuupalni mehanizam, potvrđen M2 markerom CD206, s ciljem rezolucije upale i ponovnog uspostavljanja homeostaze. Povećane razine HIF-1α i HSP70 također upućuju na dvojaki fenotip zbog svojih učinaka na staničnu regulaciju primarnih funkcija oba aktivacijska stanja poput fagocitoze i povećanja ekspresije citoprotektivnih gena. Dobiveni bipolarni oblik stanica pokazuje dvojaki fenotip, s prisustvom i M1 i M2 markera, što upućuje na prijelazno stanje kojem je cilj i čišćenje staničnog debrisa i kontrola upale, kako ne bi došlo do prevelike neurotoksičnosti. Zaključujemo da se morfološki oblik BV-2 mikroglija stanica mijenja kao posljedica hipoksičnih uvjeta te da morfološke promjene prate i funkcijske promjene.
Keywordsmicroglia hypoxia the immune system
Committee MembersJasenka Mršić-Pelčić (committee chairperson)
Zlatko Trobonjača (committee member)
Ines Mrakovčić-Šutić (committee member)
GranterSveučilište u Rijeci
Medicinski fakultet
Lower level organizational unitsKatedra za fiziologiju, imunologiju i patofiziologiju
PlaceRijeka
StateCroatia
Scientific field, discipline, subdisciplineBIOMEDICINE AND HEALTHCARE
Basic Medical Sciences
Immunology
Study programme typeuniversity
Study levelintegrated undergraduate and graduate
Study programmeMedicine
Academic title abbreviationdr. med.
Genremaster's thesis
Language Croatian
Defense date2016-07-15
Parallel abstract (English)
Novel research constantly signifies the importance of understanding the interactions between the immune system and the central nervous systems. Microglial cells, as a part of the innate immune system, are the first responders to ischemic injuries. In-vivo function of microglial cells during the injury is still being researched, and it is unclear which phenotype the microglial cells assume in hypoxia and whether they are cytoprotective or cytotoxic. The goal of this research was to establish an in-vitro model of hypoxia and characterize the microglial phenotype under these conditions. We used the immortalized BV-2 microglial cell lines to achieve this goal. We measured the changes in cell morphology and the levels of activation markers for M1 and M2 phenotypes to establish whether the cells are predominantly pro or anti-inflammatory. BV-2 microglia cells react to hypoxia through acute inflammation, which is confirmed through high levels of IL-1β and HSP70. Subsequently, anti-inflammatory mechanisms are activated, as confirmed by the M2 marker CD206, with the goal of curbing the inflammation and reestablishing the homeostasis. Increased levels of HIF-1α and HSP70 also point out the dual phenotype of these cells due to their effects on cell regulation of phagocytosis and increased expression of cytoprotective genes. The presence of M1 and M2 markers in the bipolar cells point out to transitional nature of this state, whose goal is the removal of cellular debris and controlling the extent of the inflammation. Therefore, we can conclude that hypoxia induced changes in morphology and function in BV-2 microglial cells.
Parallel keywords (Croatian)mikroglija hipoksija imunološki sustav
Resource typetext
Access conditionAccess restricted to higher education institution's students and staff
Terms of usehttp://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
URN:NBNhttps://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:184:995288
CommitterBosa Licul